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目的 探讨细胞骨架重塑对体外大鼠跟腱来源肌腱干细胞(tendon stem cells,TSCs)成脂分化的影响.方法 取3周龄雄性SD大鼠跟腱组织,采用酶消化法分离、培养TSCs,取第3代细胞用于实验.将细胞分别以细胞松弛素D (cytochalasin D,CYD)终浓度为0、50、100、500、1 000 ng/mL的含15％FBS的DMEM培养基进行培养,倒置相差显微镜下观察细胞存活及形态变化,纤维肌动蛋白(fibros actin,F-actin)染色观察细胞骨架,Western blot检测F-actin/球状肌动蛋白(globular actin,G-actin)比值,根据结果选择CYD有效使用浓度进行后续实验.取TSCs分别采用成脂诱导培养基(诱导组)、含CYD的成脂诱导培养基(CYD+诱导组)以及普通培养基(普通组)、含CYD的普通培养基(CYD+普通组)培养3、7d,收集各组细胞行实时荧光定量PCR检测成脂分化相关特异标志性基因表达,包括过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARy)、脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)、脂肪酸结合蛋白(aP2),Western blot检测PPARγ、aP2蛋白表达.结果 CYD浓度为100 ng/mL时既能有效干扰TSCs细胞骨架F-actin的聚合,又不影响TSCs的存活,选择该浓度进行后续实验.实时荧光定量PCR及Western blot检测示,3、7d时CYD+诱导组PPARγ、LPL和aP2基因及PPARγ、aP2蛋白表达均显著高于诱导组,比较差异有统计学意义(P＜0.05).3、7d时CYD+普通组PPARγ、LPL和aP2基因表达也显著高于普通组,比较差异有统计学意义(P＜o.05).结论 细胞骨架重塑是TSCs成脂分化的一个先决条件,抑制F-actin聚合可促进TSCs的成脂分化,对肌腱病的发病机制研究具有重要意义.