【摘 要】
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[目的]通过观察染铝小鼠海马的线粒体膜电位、组织形态以及脑组织内活化的caspase-3蛋白含量表达的变化,研究caspase-3 siRNA在铝致神经细胞凋亡中的作用。[方法]取3月龄雄性
【机 构】
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山西医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室,
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[目的]通过观察染铝小鼠海马的线粒体膜电位、组织形态以及脑组织内活化的caspase-3蛋白含量表达的变化,研究caspase-3 siRNA在铝致神经细胞凋亡中的作用。[方法]取3月龄雄性昆明小鼠,按体重随机分为4组,即空白对照组(生理盐水4μL)、染铝组(0.5%AlCl3.6H2O 4μL)、Al+RNAi组(0.5%AlCl3.6H2O 3μL+目的siRNA表达载体1μL)、空载体组(0.5%AlCl3.6H2O 3μL+对照siRNA表达载体1μL),通过侧脑室注射进行染毒,连续染毒5 d,各组小鼠海马的凋亡率用流式细胞术检测;线粒体膜电位用罗丹明123(Rhl23)染色流式方法检测;观察小鼠组织学变化;脑组织中活化的caspase-3蛋白的含量用蛋白印迹(Western blot)技术检测。[结果]凋亡率结果显示:与空白对照组相比,染铝组、空载体组的细胞凋亡率升高有统计学意义(P<0.05),Al+RNAi组凋亡率尚无差别(P>0.05);线粒体经Rhl23染色呈现明亮绿色的荧光,染铝组和空载体组荧光强度较对照组明显减弱(P<0.05),Al+RNAi组与空白对照组差异无统计学意义;常规HE染色镜下可见空白对照组小鼠海马神经元排列整齐,染铝组细胞排列零乱,细胞连接松解,空载体组细胞数量减少,siRNA处理后细胞状态与空白对照组相似;活化的caspase-3蛋白表达量结果显示染铝组高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);空白对照组、空载体组、Al+RNAi组之间尚无差别(P>0.05)。[结论]RNA能通过下调caspase-3基因的表达,从而对铝致小鼠神经细胞凋亡产生抑制作用。
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