Hsa_circ_0045943靶向miR-106a对胃癌细胞生物学特性的影响

来源 :西安交通大学学报(医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tttde123
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目的 探讨hsa_circ_0045943靶向miR-106a对胃癌细胞生物学特性的影响及机制。方法 培养人胃癌细胞MKN-45、AGS和胃黏膜上皮细胞GES-1,real-time PCR检测circ_0045943在胃癌细胞中的表达;构建并转染circ_0045943的过表达和沉默腺病毒载体OE-circRNA和sh-circRNA及阴性对照OE-NC和sh-NC,采用CCK-8法检测AGS细胞在circ_0045943过表达和抑制后的增殖能力变化,TUNEL法检测细胞凋亡,transwell法检测细胞迁移和侵袭,划痕法检测细胞迁移。StarBase数据库筛选circ_0045943和miR-106a的结合位点,real-time PCR检测miR-106a表达;给予OE-circRNA和sh-circRNA,检测circ_0045943表达及miR-106a在circ_0045943过表达和抑制后的表达水平变化。结果 Real-time PCR结果显示,与GES-1相比,circ_0045943在胃癌细胞MKN-45、AGS中表达均降低(P均<0.001);CCK-8显示,OE-circRNA组AGS细胞吸光度值低于sh-circRNA组(P24 h<0.01,P48 h<0.001,P72 h<0.001);TUNE结果显示,过表达circ_0045943时AGS细胞凋亡数增多,沉默circ_0045943时凋亡数减少;transwell结果显示,OE-circRNA组AGS细胞迁移和侵袭数量均低于sh-circRNA组(P均<0.001);划痕实验结果显示,OE-circRNA组AGS细胞迁移率最低,sh-circRNA组迁移率高(P<0.001)。Starbase数据库检索circ_0045943和miR-106a具有互补结合序列。Real-time PCR结果显示,miR-106a在胃癌细胞中高表达(P<0.001);OE-circRNA和sh-circRNA处理后circ_0045943和miR-106a表达有统计学差异(P均<0.001),伴随circ_0045943表达的升高和下降,miR-106a表达出现相反变化。结论 circ_0045943在胃癌细胞中低表达,促进或抑制circ_0045943的表达可能通过靶向miR-106a而调控胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。
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