人HMGN5基因shRNA慢病毒载体构建与RNAi效率的鉴定

• 作 者: 陈鹏 马忠森 王秀丽 李博 任锦 胡娱新 郏博 刘节 石莹
• 机 构: 吉林大学第二医院,吉林省职业病防治院,吉林大学白求恩医学院临床二系,日本千叶大学融合科学研究所,东北师范大学遗传与细胞研究所
• 出 处: 中国实验诊断学
• 发表日期: 2011年1期
• 关键词: HMGN5 SHRNA 慢病毒 HMGN5 short hairpin RNA lentivirus
• 基金项目: 国家自然科学基金资助课题（30940031）

目的构建人HMGN5基因的shRNA慢病毒载体并鉴定在肺癌A549和H1299细胞上的沉默效率。方法设计HMGN5基因特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pLL-3.7载体,并筛选获得有效的shRNA慢病毒载体,在293T细胞包装成病毒颗粒,将其感染肺癌A549和H1299细胞,应用Real-time PCR方法从mRNA水平上检测HMGN5的沉默效率。结果构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确,包装病毒后滴度达到5×108TU/ml。shRNA慢病毒颗粒感染A549和H1299细胞后H