【摘 要】
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为探索vp2基因特异miRNA对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)复制的抑制作用,在前期研究基础上,将2个有效的vp2基因特异miRNA表达框分别克隆入含neo基因的pTarget载体中,获得miRNA单
【机 构】
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江苏畜牧兽医职业技术学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室
【基金项目】
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2012年江苏畜牧兽医职业技术学院重点支持项目(ZD1204);江苏省农业支撑项目(BE2011365)
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为探索vp2基因特异miRNA对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)复制的抑制作用,在前期研究基础上,将2个有效的vp2基因特异miRNA表达框分别克隆入含neo基因的pTarget载体中,获得miRNA单表达或双表达载体,重组载体转染DF-1细胞后经G418筛选、鸡传染性法氏囊病毒Lurket株感染,通过半定量RT-PCR法、病毒滴定法分别检测vp2基因转录子的表达情况与细胞上清中的病毒TCID50。结果表明,vp2基因转录子水平明显降低,最高降低达80.7%,病毒TCID50可下降5lg2~6lg2。前期筛选到的2个vp2基因特异的miRNA在筛选过的细胞系中均能有效抑制病毒复制,为RNA干扰技术在鸡传染性法氏囊病的防治应用中奠定了基础。
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