结核分枝杆菌lhp—esat6融合基因穿梭表达载体的构建及在BCG中的表达

• 作 者: 陈全 朱道银 骆旭东 蒋英 江山
• 机 构: 重庆医科大学微生物学教研室
• 出 处: 中国人兽共患病杂志
• 发表日期: 2004年2期
• 关键词: 结核分枝杆菌 lhp—esat6融合基因 穿梭表达载体 构建 BCG 表达 Mycobacterium tuberclousis(MTB) CFP10-ESAT

目的构建能表达结核分枝杆菌早期分泌蛋白CFP10-ESAT6融合蛋白的重组卡介苗(recombinant BCG,rBCG).方法以pQE30-CFP10-ESAT6质粒为模板,通过PCR扩增633bp lhp-esat6基因,将该基因定向克隆到穿梭表达载体pJCH02中构建重组pJCH02-CFP10-ESAT6质粒.用电穿孔法将重组质粒导入BCG菌构建rBCG,将rBCG培养23天,于收菌前3天每天45℃热诱导45min,对表达产物作SDS-PAGE及免疫印迹分析.结果重组质粒pJCH02-CFP10