【摘 要】
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目的 表达犬细小病毒VP2蛋白(CPV VP2),用于犬细小病毒病的诊断、疫苗研制和VP2蛋白功能研究.方法 采用PCR方法对CPV VP2基因进行扩增,将CPV VP2基因克隆到毕赤酵母(Pichia p
【机 构】
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中国农业大学动物医学院,北京,100094中国动物疫病预防控制中心,北京,100094;
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目的 表达犬细小病毒VP2蛋白(CPV VP2),用于犬细小病毒病的诊断、疫苗研制和VP2蛋白功能研究.方法 采用PCR方法对CPV VP2基因进行扩增,将CPV VP2基因克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPICZαA中,构建真核重组表达载体pPICZαA-VP2,将该重组质粒线性化后,转化毕赤酵母菌GS115中,在甲醇诱导下表达CPV VP2,SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达蛋白.结果 成功扩增了CPV VP2基因,构建了真核重组表达载体pPICZαA-VP2在毕赤酵母菌中表达出约64.35kD蛋白.Western blotting鉴定表明,表达VP2蛋白与犬细小病毒阳性血清有反应性.结论 在毕赤酵母中成功地表达了CPV VP2蛋白,能被犬细小病毒阳性血清识别.
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