【摘 要】
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目的构建福氏2a志贺菌301株已验证的但是功能未知的C0719基因突变体,以进行C0719RNA功能研究。方法根据福氏2a志贺菌301株基因组全序列,采用λ-Red重组系统对C0719RNA基因进
【机 构】
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海军总医院检验科,军事医学科学院生物工程研究所
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目的构建福氏2a志贺菌301株已验证的但是功能未知的C0719基因突变体,以进行C0719RNA功能研究。方法根据福氏2a志贺菌301株基因组全序列,采用λ-Red重组系统对C0719RNA基因进行缺失,并经PCR验证;对野生株和C0719缺失突变株37℃时的生长曲线及生化反应进行比较研究;对野生株和5个sRNAs缺失突变株进行蛋白质组的比较研究;同时利用毒力侵袭模型来评价突变株毒力。结果构建了C0719缺失突变株;突变株初始生长均较慢,但最终和野生株状态一致;对构建成功的C0719缺失突变体进行生化特性分析,结果表明和野生株相比,301ΔC0719株利用棉子糖的能力比野生株强一些;对C0719缺失突变体进行了比较蛋白质组分析。结论获得了福氏2a志贺菌301株C0719基因突变体,为深入研究sRNA基因的功能奠定了基础。
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