负载miRNA-27b的BMSCs来源的外泌体治疗实验性骨关节炎

来源 :中国矫形外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fangli95680
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[目的]探讨负载miRNA-27b的间充质干细胞来源的外泌体(MSC-27b-Exos)对炎症环境下的软骨细胞的保护作用。[方法]体外利用10 ng/ml白介素-1β(IL-1β)建立软骨细胞炎症环境模型,采用超速离心法收集外泌体,分别以80μg/ml的MSC-27b-Exos,普通外泌体MSC-Exos、inhibitor沉默的MSC-27boff-Exos作用炎症环境下的软骨细胞,并设PBS处理为对照组,检测各处理组软骨细胞凋亡水平,Western blot检测软骨细胞中MMP-13,及凋亡蛋白Caspase的表达水平。体内实验:20只雄性SD大鼠随机分为4组,建立创伤性骨关节炎(post-traumatic osteoarthritis, PTOA)模型,分别注射等量的MSC-miR27b-Exos、MSC-miR27boff-Exos,并设立单纯PBS组和假手术组,6周后取材,观察关节软骨形态;ELISA检测关节液中IL-1β、TNF-α的含量;免疫组化对比各组Ⅱ型胶原表达。[结果]体外实验中,MSC-27b-Exos组的软骨细胞增殖能力较MSC-miR27boff-Exos组增强,较空白组明显旺盛(P<0.05),在炎症环境下软骨细胞凋亡明显减弱(P<0.05),MSC-27b-Exos组软骨细胞中cleave-Caspase-9水平降低(P<0.05),cleave-Caspase-3水平降低(P<0.05),MMP-13相对含量减少。SD大鼠体内实验显示, MSC-27bExos组对软骨缺损修复效果优于空白组和MSC-miR27boff-Exos组。MSC-27b-Exos组关节液中IL-1β、TNF-α的含量低于空白组,明显低于MSC-27boff-Exos组。[结论]在实验型SD大鼠PTOA模型中,利用MSC-27b-Exos关节腔内注射具有明显抗炎的作用和减缓关节软骨退行性变。
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