【摘 要】
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目的建立以基因测序检测乙型肝炎病毒(HBV)多聚酶区基因突变的方法,并分析拉米夫定耐药者HBV多聚酶区基因主要耐药突变的分布情况。方法采用巢式PCR方法对174例拉米夫定耐药
【机 构】
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解放军第三○二医院全军传染病研究所病毒性肝炎研究室,解放军第三○二医院全军传染病研究所肝衰竭治疗研究中心,北京地坛医院,解放军第三○二医院全军传染病研究所临床检验中心,解放军第三○二医院院办,
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目的建立以基因测序检测乙型肝炎病毒(HBV)多聚酶区基因突变的方法,并分析拉米夫定耐药者HBV多聚酶区基因主要耐药突变的分布情况。方法采用巢式PCR方法对174例拉米夫定耐药患者血清HBV多聚酶区进行扩增,对PCR产物进行直接测序,将YMDD突变阳性与阴性的病例分别进行HBV耐药基因突变的分析和比较。结果本研究154例YMDD突变阳性的患者中有10种突变类型,其中以rt M204I突变最多见,为46例(29.9%),其次为rt L180M/M204V(26.6%)、rt L180M/M204I(17.5%)、rt V173/L180M/M204V(13.0%)、rt M204V(2.6%)、rt L180M/M204V/M204I(5.8%)、rt V173L/L180M/M204V/M204I(1.3%)、rt V173L/M204I rt M204I/M204V(1.3%)、rt M204I/M204V(1.3%)。另外,rt M204V联合rt L180M或rt V173L的突变率较rt M204I联合rt L180M或rt V173L显著增高。从rt L180M突变角度来看,rt L180M与rt M204V的联合突变率最高,其次为rt L180M联合rt M204I突变,rt L180M与rt L173M的联合突变率最低。从rt V173L突变角度来看,rt V173L联合rt M204V或rt L180M突变的发生率均高于rt V173L联合rt M204I的突变率,且rt V173L突变多联合rt M204V和rt L180M突变同时发生。结论拉米夫定耐药株的氨基酸突变复杂多样,需要对拉米夫定耐药多个相关位点进行检测。
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