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背景 Leber遗传性视神经病变(LHON)与视神经炎的病因和治疗方法均不相同,但由于其临床表现相似,因此易被误诊.利用实时荧光定量PCR技术建立一种高通量、简便、快速、特异性高的LHON检测方法具有重要的临床意义. 目的 建立以实时荧光定量突变特异性Taqman探针技术检测LHON线粒体DNA(mtDNA) 11778G＞A突变的方法,实现快速、简便、准确地筛查mtDNA 11778位点突变LHON患者. 方法 根据mtDNA全基因组序列设计针对mtDNA 11778G＞A突变的特异性Taqman探针和引物,从河南省眼科研究所分子生物室LHON DNA库任意选取标本84份,另抽取40名18～ 20岁健康体检者的血样40份作为正常对照,分别用实时荧光定量特异性探针法和序列测定法检测LHON mtDNA 11778G＞A突变,并对检测方法进行可靠性验证. 结果 用实时荧光定量Taqman探针法检测mtDNA 11778G＞A突变,84例视神经病变患者中发现mtDNA 11778G＞A突变者23例,阴性结果者61例,23例阳性患者样本扩增曲线结果显示Ct值为22.993±0.708,正常对照组样本Ct值均为0,与直接测序法检测结果完全相符,其符合率为100％,未发现假阳性和假阴性结果者. 结论 用实时荧光定量突变特异性Taqman探针法检测LHON mtDNA 11778G＞A突变位点的方法简单、省时、准确、直观、特异性强、敏感度高,适用于对LHON mtDNA 11778G＞A突变的大规模筛查或预防性检查。