【摘 要】
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目的介绍组织块法结合胰蛋白酶消化法培养、分离人口腔黏膜上皮细胞和成纤维细胞。方法选择10例患者第三磨牙拔除时切除的龈瓣,大小为(1×0.5)cm~2/块。将带有上皮层和固有层
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院口腔科,中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院病理科,中国医学科学院基础医学研究所生物化学与分子生物学系,
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目的介绍组织块法结合胰蛋白酶消化法培养、分离人口腔黏膜上皮细胞和成纤维细胞。方法选择10例患者第三磨牙拔除时切除的龈瓣,大小为(1×0.5)cm~2/块。将带有上皮层和固有层的组织块种植于培养瓶中,待组织块细胞增殖后,通过胰蛋白酶消化法分离获得原代上皮细胞和成纤维细胞。采用免疫荧光和HE染色进行细胞鉴定。结果组织块植入后的第2 d~3 d可看到组织块周边出现新分裂增殖的细胞,14 d细胞增殖达到0.5 cm~1.0 cm后,进行初次传代。胰蛋白酶消化法可初步分离出上皮细胞和成纤维细胞。通过在不同培养基中的传代培养,2种细胞可以获得进一步纯化。结论组织块法结合胰蛋白酶消化法能快速高效的培养分离口腔上皮细胞和成纤维细胞,是一种实用的口腔黏膜细胞培养方法。
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