目的 探讨人脐带间质干细胞体外条件下调控人原代肝细胞增殖及功能的作用及其机制.方法 实验组将人脐带间质干细胞/原代肝细胞按1 ×105/1 ×105(个/孔)的比例接种于Transwell共培养板上下层共培养;对照组为原代肝细胞单独培养;共培养1、3、7d后应用流式细胞仪分析细胞周期;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白蛋白(ALB)和尿素的分泌;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ALB、细胞角蛋白-18(CK18)、肝细胞生长因子(HGF)及c-met mRNA的表达.结果 共培养1、3、7d后原代肝细胞处于S期细胞比例与对照组比较明显增多,且增殖作用随共培养时间的增多而加强,差异有统计学意义(55.71％ ＞44.53％ ＞36.02％ ＞29.13％,P＜0.05);共培养组ALB分泌量(μg/L)明显增加,差异有统计学意义(21.18＞ 17.12,30.90＞ 13.46,15.14＞8.80,P ＜0.05),尿素分泌量(mg/L)得出同样的结果(211.18＞ 190.40,280.84＞ 75.64,152.06＞ 33.90,P ＜0.05),在共培养各组别中,共培养3d时,尿素及白蛋白达到峰值,差异有统计学意义(P＜0.05),而且共培养7d时仍保持较高水平的尿素及白蛋白分泌水平,与共培养1d比较,差异无统计学意义(P＞0.05);与对照组比较,共培养各组别(1、3、7d)均可上调细胞内ALB、CK18、HGF及c-met mRNA的表达,共培养3d时原代肝细胞(PHHs)细胞内ALB mRNA上调最显著,而CK18、HGF及c-met mRNA的表达上调则在共培养7d时最为显著.结论 人脐带间质干细胞在体外条件下可通过旁分泌机制促进人原代肝细胞的生长增殖,保护其细胞功能,上调人原代肝细胞内HGF及其受体的表达可能是其中的机制之一。
人脐带间质干细胞体外条件下调控人肝细胞生长及功能的研究
【摘 要】
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目的 探讨人脐带间质干细胞体外条件下调控人原代肝细胞增殖及功能的作用及其机制.方法 实验组将人脐带间质干细胞/原代肝细胞按1 ×105/1 ×105(个/孔)的比例接种于Transwell共培养板上下层共培养;对照组为原代肝细胞单独培养;共培养1、3、7d后应用流式细胞仪分析细胞周期;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白蛋白(ALB)和尿素的分泌;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ALB、
【机 构】
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510530广州,中山大学附属第三医院岭南医院普通外科,510530广州,中山大学附属第三医院岭南医院普通外科,510530广州,中山大学附属第三医院岭南医院普通外科,510530广州,中山大学附属第
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2014年31期
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