【摘 要】
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目的:蛋白残留量是影响酶法工艺生产半合成类抗生素的关键质量属性之一,它不仅影响药品质量,还会威胁人用药安全.本文尝试采用微流控芯片毛细管电泳(microfluidic chip-based
【机 构】
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中国食品药品检定研究院,北京102629;吉林大学白求恩第一医院神经内科和神经科学中心,长春130021;西安交通大学医学部药学院,西安710061
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目的:蛋白残留量是影响酶法工艺生产半合成类抗生素的关键质量属性之一,它不仅影响药品质量,还会威胁人用药安全.本文尝试采用微流控芯片毛细管电泳(microfluidic chip-based capillary electrophoresis,MCCE)技术对青霉素类产品中的蛋白残留量进行分析和测定,并对MCCE法的影响因素和测定准确性进行了探讨.方法:以酶法工艺典型青霉素类药品-阿莫西林为例,采用Agilent高灵敏蛋白250型试剂盒分别对催化酶蛋白和阿莫西林样品进行前处理,再将处理后的溶液上样至蛋白芯片(5cm×5cm×0.8cm),最后采用Agilent生物分析仪2100进行分析与检测.该法蛋白分子量检测范围为10 ～ 250 kDa;分析时间为30 min;样品量为9μL.结果:牛血清白蛋白(BSA)在5～ 500 ng·mL-1(r =0.99,n=4)的浓度范围内线性关系良好;蛋白分子量测定准确度约为100.6％ (n =4 ×7),不同浓度BSA在阿莫西林溶液中得到的加标回收标准曲线与BSA标准曲线之间没有显著性差异(P =0.28 ＞0.05,n=4),显示准确度良好;检测限和定量限分别约为3 ng· mL-1(1.5 ppm)和10 ng· mL-1 (5.0 ppm);定量日内和日间精密度均＜15％(n=4);BSA在阿莫西林溶液中6h内基本稳定(RSD＜3.4％).结论:本研究建立MCCE法可用于酶法工艺产品阿莫西林中残留蛋白的测定,方法简便快速、灵敏度高且准确性好,为酶法工艺半合成抗生素中残留蛋白的测定提供了一种不同原理的检测手段.
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