探讨儿童急性髓细胞性白血病(AML)中WASP家族Verprolin同源蛋白1(WAVE1)基因参与P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达和调控的机制。
方法将52例患儿依据是否在随访期内持续缓解(CCR)分为难治/复发组和缓解组，应用实时定量PCR(RQ-PCR)法和蛋白印迹(Western blot)分别检测52例AML患儿治疗前及疾病发展过程中骨髓单个核细胞(BMMCs)中WAVE1、P-gp、MRP1、LRP及BCRP蛋白和基因mRNA的表达水平。将PCDNA3.1-WAVE1真核表达质粒转染HL60细胞构建WAVE1高表达HL-60细胞，将WAVE1基因的特异性小片段干扰RNA(WAVE1 siRNA)转染HL60/ADR构建WAVE1低表达HL60/ADR细胞；Western blot和RQ-PCR法检测基因转染前后白血病细胞系WAVE1、MRP1及BCRP蛋白及基因的表达水平。
结果①复发/难治组病例的WAVE1及耐药相关基因水平明显高于缓解组患儿WAVE1基因表达水平(P<0.05)；②同一患儿初治及复发时的WAVE1基因水平明显高于缓解期表达水平(P<0.05)；③与HL60细胞相比较，HL60/ADR细胞WAVE1 mRNA及蛋白表达水平增加3.53倍及95%；④转染WAVE1后HL60细胞系MRP1 mRNA和蛋白表达水平分别增加16.54倍、129%，BCRP mRNA和蛋白表达水平分别增加4.93倍及96%，而转染WAVE1 siRNA的HL60/ADR细胞MRP1 mRNA和蛋白的表达水平为干扰前的0.11倍及43%，BCRP mRNA和蛋白的表达水平为转染前的0.14倍及71%。
结论WAVE1与儿童AML的病程及预后相关，参与了髓系白血病细胞多药耐药的形成并可影响MRP及BCRP1等多个重要的耐药相关基因的表达和作用。