人TAT-PDX-1融合蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化

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【摘要】

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目的构建人TAT-PDX-1表达载体,并对其融合蛋白进行纯化。方法采用RT-PCR技术从人胰腺组织中获得目的基因hPDX-1,将TAT序列与PDX-1克隆到原核表达载体pET-28a;用IPTG诱导、表

【作者】

：

苗成宋波王茜张宁韩志强许予明

【机构】

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郑州大学第一附属医院

【出处】

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山东医药

【发表日期】

：

2011年19期

【关键词】

：

原核表达蛋白转导域胰十二指肠同源盒基因-1 prokaryotic expression protein transduction domain pan

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目的构建人TAT-PDX-1表达载体,并对其融合蛋白进行纯化。方法采用RT-PCR技术从人胰腺组织中获得目的基因hPDX-1,将TAT序列与PDX-1克隆到原核表达载体pET-28a;用IPTG诱导、表达融合蛋白;NiNTAagaros纯化融合蛋白,Western blot鉴定。结果目的片段PDX-1被有效扩增,DNA序列测定表明所构建重组质粒pET28a-TAT-h PDX-1与设计相同;TAT-PDX-1融合蛋白在大肠杆菌中获得高效表达并成功纯化。结论成功地获得了TAT-hPDX-1融合基因的表达产物

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