快速PCR法与常规法检测动物细胞培养物污染支原体的比较研究

• 作 者: 魏红梅 袁曾麟 陈天寿
• 机 构: 中国药品生物制品检定所
• 出 处: 中国实验动物学报
• 发表日期: 1994年2期
• 关键词: 阳性 阴性 支原体 PCR法 扩增 培养法 荧光染色 动物细胞培养 DNA PCR产物 Two-step PCR Direct culture test DNA

本文报告两步PCR法快速检测污染动物细胞培养物的支原体（Mycoplasma），外部引物PF1，PR1和内部引物PF2，PR2选自rRNA操纵子16SrRNA，23SrRNA空间保守区域，第一步PCR产物长度在303—527bp之同，第二步PCR产物长度在110—308bp之间，此方法能扩增污染细胞常见的七种支原体，灵敏度达到203fg/ml，不能扩增常污染细胞的CMV、E.coli以及SP2/0细胞，Hela细胞的DNA，53株细胞境况物，PCR检测20株（37.7%）为阳性，直接培养法检测13株（24