【摘 要】
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目的 观察微小RNA (miR)-335靶向Sp1对乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响.方法 选取MCF-7为研究对象,采用荧光素酶报告基因实验验证miR-335对Sp1的靶向作用;采用反转录-聚合酶链反
【机 构】
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430060,武汉大学人民医院乳腺甲状腺外科;武汉市中心医院甲状腺乳腺外科;
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目的 观察微小RNA (miR)-335靶向Sp1对乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响.方法 选取MCF-7为研究对象,采用荧光素酶报告基因实验验证miR-335对Sp1的靶向作用;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中miR-335及Sp1 mRNA表达;采用West blot检测细胞中Sp1蛋白表达;采用噻唑蓝(MTT)法检测MCF-7增殖水平.结果 与正常乳腺上皮细胞株HBL-100比较,MCF-7中miR-335表达显著降低(0.93 ±0.11比2.94±0.13),Sp1蛋白表达显著增加(0.89±0.08比0.42±0.05,P＜0.01).miR-335可与Sp1基因3-非翻译区(UTR)特异性结合.转染miR-335 mimic可使MCF-7中miR-335表达显著提高,Sp1蛋白表达显著降低,细胞增殖受到抑制;转染miR-335 mimic+ Sp1可使Sp1蛋白表达显著提高,同时部分逆转miR-335对MCF-7细胞增殖的抑制作用.结论 miR-335可通过靶向Sp1抑制乳腺癌细胞株MCF-7增殖.
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