【摘 要】
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目的体外研究尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT1A10)基因SNP rs10187694多态位点G/A变异对吗替麦考酚酯(MMF)代谢的影响,明确该位点变异是否与MMF个体代谢差异有关。方法采用
【机 构】
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上海交通大学附属第一人民医院普外科;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No:81270557,81110108010)
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目的体外研究尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT1A10)基因SNP rs10187694多态位点G/A变异对吗替麦考酚酯(MMF)代谢的影响,明确该位点变异是否与MMF个体代谢差异有关。方法采用基因重组、定点突变技术,构建UGT1A10基因SNP rs10187694位点含有不同等位基因的重组过表达载体,POLO 3000转染法将重组过表达载体转染入HEK293细胞,采用液相色谱-质谱联用仪(LC/MS/MS)系统,检测霉酚酸(MPA)代谢产物7-O-葡醛酸苷(MPAG)的生成量,以评估转染不同等位基因HEK293细胞中酶的活性。结果成功构建pIRES2-EGFP-prom(G)和pIRES2-EGFP-prom(A)重组过表达载体,并转染HEK293细胞。LC/MS/MS系统检测结果显示,携带A等位基因的突变型UGT1A10代谢MMF产生MPAG的能力降低,其24 h MPAG的生成量为(226.00±14.57)nmol/L,而野生型的生成量为(269.00±14.07)nmol/L,UGT1A10突变型MPAG的生成量是野生型的84.00%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 UGT1A10基因SNP rs10187694位点G/A突变可影响MMF代谢产物MPAG的生成,可能是造成不同个体MMF代谢差异的重要原因之一。
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