Tat蛋白转导结构域介导HSV1-TK导入肝癌细胞及其效应

• 作 者: 曹利民 王炜煜 赵晓蓉 叶庆 雷萍 刘静 代维 朱荫昌 司进
• 机 构: 华中科技大学同济医学院免疫学系,华中科技大学同济医学院同济医院普外科,江苏省寄生虫病防治研究所
• 出 处: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 发表日期: 2006年3期
• 关键词: HIV-1 TAT HSV1-TK 蛋白转导 肝癌 基因治疗 HIV-1 Tat HSV1 -TK protein transduction hepa
• 基金项目: 国家重点基础研究发展规划（“973”计划）项目（2002CB513109）,卫生部科研基金（WKJ2004-2-013）

目的：探讨HIV-1编码的反式激活蛋白Tat与HSV1-TK融合表达对肝癌细胞的杀伤效果。方法：合成编码HIV-Tat47-57（Tat 11）的2条寡核苷酸单链，两端分别引入BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两个酶切位点，退火形成寡核苷酸双链，15％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳判断退火效果；以r-pAs16Dr为模板，通过PCR扩增HSV1-TK基因，定向克隆至原核表达载体pET-32中。将含pET-32c-Tat 11-TK的BL21菌通过IPTG诱导表达，表达产物用Ni^（2＋）螯合柱亲和纯化，免疫组化分析重组