【摘 要】
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为提高纳豆激酶在大肠杆菌中的表达量,在不改变蛋白质序列的前提下,对纳豆激酶氨基端编码前20个氨基酸的序列进行改造,以降低此区域的GC含量及稀有密码子数量,其中有3个位点
【机 构】
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成都体育学院运动医学系,广州暨南大学生物工程研究所
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为提高纳豆激酶在大肠杆菌中的表达量,在不改变蛋白质序列的前提下,对纳豆激酶氨基端编码前20个氨基酸的序列进行改造,以降低此区域的GC含量及稀有密码子数量,其中有3个位点直接采用T,另有4个位点采取不确定突变的方式,产生16种组合,由此而得16条序列,利用生物信息软件DNASIS v2.5对这些序列的二级结构进行模拟,取得自由能绝对值最低的6条序列设计引物,克隆至表达载体pET-3c,导人大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,其中有3株菌形成明显高效表达.
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