粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子与HBsAg融合蛋白基因的分子克隆及序列测定

• 作 者: 薛净 程云 罗清华 李伯安 郭仁峰 张郁 施红 曹阳 林秀玉 杨守纯
• 机 构: 100039 北京 解放军302医院,100039 北京 解放军302医院,100039 北京 解放军302医院,100039 北京 解放军302医院,100039 北京 解放军302医院,第四军医大
• 出 处: 中华实验和临床病毒学杂志
• 发表日期: 1998年12期
• 关键词: 融合蛋白 聚合酶链反应 扩增产物 基因对 生物学活性 免疫活性 基因构建 序列测定 分子克隆 限制酶

目的

研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）的免疫活性。

方法

用聚合酶链反应（PCR）技术扩增出粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）384bp的基因片段及HBsAg 846bp基因片段，扩增产物经柱纯化后，由T4DNA酶连结为1 230bp的片段，将此片段命名为LGH，克隆到pUC19质粒中，利用菌落PCR法快速筛选阳性克隆及限制酶切鉴定插入片段的大小。

结果

该基因全长1 230bp，经序列分析，证实为GM-CSF-HBsAg基因。

结论

GM-HBsAg融合蛋白基因构建成功，为进一步研究其生物学活性及表达奠定了基础。