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目的建立基于近红外免疫层析技术的简单快速、适用于现场的轮状病毒检测方法。方法利用双抗体夹心法原理,用近红外荧光染料Dylight 800标记轮状病毒单克隆抗体5B1和鸡IgY抗体,将轮状病毒单克隆抗体3E3和羊抗鸡Ig Y多克隆抗体喷涂于硝酸纤维膜上分别作为检测线和质控线,制备检测轮状病毒的近红外免疫层析试纸条。依据便携式荧光扫描仪读取的检测线和质控线荧光值比值(T/C值)判断检测结果。结果阴性样品的cut-off值为0.069。建立的近红外荧光免疫层析试纸条特异性良好,与腺病毒、诺如病毒、肠道病毒