【摘 要】
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目的 探讨Tip60对细胞辐射敏感性的影响及相关机制.方法 采用siRNA和Tip60乙酰转移酶抑制剂漆树酸,抑制U2OS细胞中Tip60的表达或乙酰转移酶活性；用克隆形成率分析细胞对60Co
【机 构】
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军事医学科学院放射与辐射医学研究所
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目的 探讨Tip60对细胞辐射敏感性的影响及相关机制.方法 采用siRNA和Tip60乙酰转移酶抑制剂漆树酸,抑制U2OS细胞中Tip60的表达或乙酰转移酶活性；用克隆形成率分析细胞对60Co γ射线的敏感性；采用γ-H2AX原位免疫荧光集簇点法,检测DNA双链断裂损伤修复；用免疫共沉淀检测蛋白质的相互作用.结果 siRNA沉默Tip60表达明显提高了U2OS细胞对1、2 Gy中、低剂量γ射线的敏感性(t=3.364、3.979,P＜0.05),但对4 Gy大剂量照射的细胞存活率无明显影响.γ-H2AX集簇点检测结果表明,照射后1、4和8h,Tip60失活导致细胞DNA双链断裂修复能力降低(t=3.875、3.183和3.175,P＜0.05).细胞在受到电离辐射损伤后,Tip60与DNA修复蛋白DNA-PKcs发生相互作用,漆树酸能抑制DNA-PKcs的T2609位点的磷酸化.结论 Tip60通过与DNA-PKcs相互作用,调控细胞DNA双链断裂修复机制,对细胞辐射敏感性产生影响.
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