胰酶消化法纯化诱导不同年龄段SD大鼠骨髓破骨细胞的体外培养

• 作 者: 董强 梁星 陈悦 徐凌 张庆鸿 夏露 陈明 付俊
• 机 构: 四川大学口腔生物医学工程教育部重点实验室,四川大学华西口腔医院修复科
• 出 处: 华西口腔医学杂志
• 发表日期: 2006年4期
• 关键词: 风口破骨细胞 胰酶消化 培养 纯化 osteoclast： trypsin digestion culture purify
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30271428）：教育部“优秀青年教师资助计划”资助项目[教人司（2002）40号],高等学校博士学科点专项科研基金资助项目（B1200058）

目的用胰酶消化法纯化获取大量高纯度破骨细胞，为进行相关分子生物学研究奠定基础。方法以1,25-（OH）2D3/地塞米松诱导培养不同年龄段（1、12、24、36d）SD大鼠的骨髓破骨细胞，采用0．25％胰蛋白酶，0．02％乙二胺四乙酸纯化。通过倒置相差显微镜观察细胞形态，采用抗酒石酸酸性磷酸酶（Trap）染色和扫描电镜观察鉴定破骨细胞，并计数分析。结果1、12、24、36d组大鼠骨髓破骨细胞均培养成功，经Trap染色和扫描电镜观察证实为体外有噬骨能力的破骨细胞，纯化率达到90％。1d和12d组破骨细胞出现较