【摘 要】
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本论文从刺参中分离纯化得到一种海参肽,并研究其对NIH/3T3细胞增殖和胶原蛋白分泌的影响。采用活性追踪的方法从新鲜刺参中通过离子交换层析、凝胶层析分离纯化得到海参肽SP
【机 构】
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山东大学(威海)海洋学院; 山东大学药学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81371455)
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本论文从刺参中分离纯化得到一种海参肽,并研究其对NIH/3T3细胞增殖和胶原蛋白分泌的影响。采用活性追踪的方法从新鲜刺参中通过离子交换层析、凝胶层析分离纯化得到海参肽SP12,采用MTT法检测SP12对NIH/3T3细胞的增殖作用;采用流式细胞术检测SP12对NIH/3T3细胞细胞周期的影响;采用羟脯氨酸测定试剂盒的方法检测SP12对NIH/3T3细胞胶原蛋白分泌的影响;采用Western Blot及RT-PCR的方法,在蛋白水平及基因水平上检测SP12对NIH/3T3细胞I型胶原蛋白、MMP-1及TIMP-1表达的影响。结果表明SP12能显著提高NIH/3T3细胞的增殖率,能促进NIH/3T3细胞由G1期向S期转变,增加其胶原蛋白的分泌量,且在0~20μg/mL范围内均呈剂量依赖性。在蛋白水平和基因水平,SP12均能显著促进I型胶原蛋白及TIMP-1的表达,抑制MMP-1的表达,这可能是SP12促进NIH/3T3细胞胶原蛋白分泌的作用机制。
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