胶质瘤患者人源性噬菌体抗体基因库的构建

来源 :中华神经外科疾病研究杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shensq
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目的构建胶质瘤患者人源性噬菌体抗体基因库.方法从脑胶质瘤患者外周血淋巴细胞(PBL)中提取细胞总RNA,经逆转录后用套式多聚酶链反应(PCR)分别扩增抗体轻链Vκ和重链VH基因.先构建Vκ基因库,并使linker与Vκ基因连接,再将VH基因克隆入Vκ基因库,即构建成功单链抗体(ScFv)基因库.随机挑取菌落鉴定后测序.结果从PBL中扩增出人源性Vκ和VH基因,并构建了库容量约为2×106 的ScFv噬菌体抗体基因库.随机挑取克隆的测序结果表明,测定的VH基因与Kabat 的抗体基因库中人抗体VH
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