科罗索酸诱导多发性骨髓瘤U266细胞凋亡机制研究

来源 :中华肿瘤防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fzy321
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目的科罗索酸(corosolic acid,CA)是近年来新发现的中药有效成分,对多种实体肿瘤细胞有杀伤作用。但其对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞的作用目前尚不明确。本研究探讨CA对MM U266细胞增殖、凋亡的影响及其潜在机制。方法实验分为对照组和CA处理组,对照组为未使用CA处理的U266细胞,CA处理组为使用不同浓度CA处理的U266细胞,CCK-8法检测对细胞增殖的影响,流式细胞术检测对细胞周期和凋亡的影响,分光光度法检测对Caspase-3活性的影响。使用Caspase抑制剂Ac-DEVD-CHO预处理U266细胞后,CCK-8法检测CA对细胞活力的影响。结果10μmol/L CA作用U266细胞24、48、72h后,细胞增殖活力分别为(98.12±4.63)%、(93.03±4.96)%、(86.43±3.13)%;20μmol/L CA细胞增殖活力分别为(93.26±5.24)%、(85.34±3.87)%、(68.72±4.27)%;30μmol/L CA细胞增殖活力分别为(85.51±6.35)%、(72.65±4.25)%、(47.81±6.33)%;40μmol/L CA细胞增殖活力分别为(68.82±5.86)%、(47.45±6.06)%、(21.93±5.92)%;50μmol/L CA细胞增殖活力分别为(49.31±4.92)%、(25.28±5.31)%、(10.84±4.86)%。各浓度组作用不同时间差异有统计学意义,F(时间)=144.3,P<0.001;不同浓度组之间差异有统计学意义,F(浓度组)=234.4,P<0.001。对未经CA处理的对照组和使用40μmol/L CA处理的实验组细胞进行细胞周期分析,处于G0/G1期细胞比例分别为(51.13±6.54)%和(76.45±5.25)%,差异有统计学意义,t=6.751,P<0.001;S期细胞比例分别为(41.56±5.32)%和(18.44±4.76)%,差异有统计学意义,t=7.242,P<0.001;G2/M期的细胞比例分别为(7.31±0.73)%和(5.11±0.64)%,差异有统计学意义,t=5.0672,P<0.001。对未经CA处理和使用不同浓度CA(20、40、60μmol/L)处理的U266细胞进行流式细胞术检测,发生凋亡的细胞比例分别为(4.21±1.28)%、(25.63±4.65)%、(51.17±5.92)%、(68.56±8.14)%,4组之间差异有统计学意义,F=128.5,P<0.001。未使用CA的对照细胞和使用不同浓度(20、40、60μmol/L)CA处理的U266细胞中Caspase-3的相对活性分别为(100±25)%,(324±46)%、(601±72)%、(796±126)%,4组之间差异有统计学意义,F=78.65,P<0.001。20μmol/L CA培养的细胞中,未使用和使用Caspase抑制剂Ac-DEVD-CHO预处理的细胞增殖活力分别为(74.66±6.32)%和(88.24±6.51)%,差异有统计学意义,t=3.347,P=0.011;40μmol/L CA培养的细胞中,未使用和使用Caspase抑制剂预处理的细胞增殖活力分别为(46.53±7.46)%和(75.36±8.17)%,差异有统计学意义,t=5.827,P<0.001;60μmol/L CA培养的细胞中,未使用和使用Caspase抑制剂预处理的细胞增殖活力分别为(16.91±3.82)%和(48.52±5.29)%,差异有统计学意义,t=10.832,P<0.001。结论 CA能显著抑制骨髓瘤U266细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与CA能增强Caspase活性有关。
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