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MYB转录因子在植物的生长发育、生理代谢、细胞的形态和模式建成等生理过程中发挥重要作用.为了研究一个在优质烟草杂交种及其亲本中差异表达的R2R3-MYB转录因子NtMYB4a的功能.本研究采用PCR技术从烟草中分离出MYB4a的cDNA全长,构建NtMYB4a基因的过表达载体pART-CAM-NtMYB4a.通过根癌农杆菌介导法转化烟草自育品系GDH88获得转化植株,经卡那霉素抗性筛选得到162株抗性苗,PCR检测发现有67株阳性苗,转化率为41.4％.qRT-PCR检测表明NtMYB4a基因在转基因植株的花、茎和叶中的表达量显著提高.为后续研究NtMYB4a的功能提供了试验材料与研究基础.