海参溶菌酶C端多肽在毕赤酵母中的重组表达

来源 :大连工业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sqs292241644
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为构建并筛选具有抑菌活性的重组海参溶菌酶C端(sjLys-C)多肽的毕赤酵母基因工程菌,根据已构建的pMDl8-T-sjLys-C质粒为模板,设计特异性引物,扩增出带有EcoRI和NotI酶切位点的海参溶菌酶C端多肽基因,将其亚克隆到真核表达载体pPIC9K上,构建重组表达质粒pPIC9K-SjI-ys-C。该重组质粒经BglⅡ线性化后,采用电转化方式将线性DNA转化至毕赤酵母GSll5中,经含不同浓度抗生素G418的YPD培养基筛选鉴定转化子,再经1%甲醇诱导表达,共筛选出4株高拷贝重组海参溶菌c端多肽
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