探讨TNF-α活化的人源骨髓间充质干细胞(MSC)对结肠癌细胞株HT29生长、转移的影响。
方法制备、收集MSC条件培养液(CM)及TNF-α活化的MSC(T-MSC)条件培养液(TCM)。采用MTT比色法检测在α-最低基础培养液(α-MEM)、CM、TCM中培养2、4、6 d的HT29细胞增殖率。制备下层不接种细胞、接种MSC或接种T-MSC，上层均含有HT29细胞的双层软琼脂糖共培养体系，表面加入α-MEM后培养30 d，检测单细胞肿瘤集落形成能力。利用悬滴法制备的HT29肿瘤球进行3D基质胶侵袭实验，检测α-MEM、CM、TCM中HT29细胞的侵袭能力。实时聚合酶链反应检测在α-MEM、CM、TCM中培养的HT29细胞中上皮钙黏素mRNA表达变化。两组数据比较采用成组t检验，多组数据比较采用单因素方差分析。
结果培养4～6 d后，CM或TCM组HT29细胞增殖率显著高于α-MEM组(第4、6天各组吸光度值分别为0.57±0.06、0.51±0.02、0.22±0.01和0.45±0.01、0.73±0.04、0.15±0.02)，差异均有统计学意义(tCM＝8.090、21.140, tTCM＝21.190、17.950；P均<0.05)。软琼脂糖实验培养后30 d，T-MSC共培养的HT29单细胞集落数目明显多于其他两组。3D侵袭实验中TCM刺激后HT29向周围侵袭能力强于α-MEM组[侵袭率分别为(82±2)%和(65±8)%]，差异有统计学意义(t＝2.848，P<0.05)。TCM刺激后HT29细胞中膜上皮钙黏素mRNA水平较α-MEM组显著下降(0.32±0.02比1.00±0.00)，差异有统计学意义(t＝35.190，P<0.05)。
结论TNF-α活化的人源MSC可促进结肠癌细胞生长及侵袭。