【摘 要】
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目的构建GST-SRY融合蛋白原核表达载体,在E.coli中诱导其表达,并进行纯化.方法 PCR扩增SRY基因,将SRY基因插入原核表达载体p GEX-6P-1,经酶切和测序验证后,p GEX-6p-1-SRY转
【机 构】
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大理大学基础医学院,云南省高校细胞生物学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31360288)
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目的构建GST-SRY融合蛋白原核表达载体,在E.coli中诱导其表达,并进行纯化.方法 PCR扩增SRY基因,将SRY基因插入原核表达载体p GEX-6P-1,经酶切和测序验证后,p GEX-6p-1-SRY转化到原核表达菌株E.coli Rosetta DE3,IPTG诱导表达GST-SRY融合蛋白,用GST标签纯化树脂对其进行纯化.结果经双酶切和测序证实p GEX-6P-1-SRY构建正确.重组质粒转化到Rosetta DE3经IPTG诱导后表达了分子质量单位约为49 KD的重组蛋白.结论 p GEX-6P-1-SRY原核表达载体构建成功,SRY蛋白成功诱导表达并纯化,为今后深入研究SRY蛋白的功能奠定了实验基础.
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