【摘 要】
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Objective:In traditional Chinese medicine,the herbal pair,Radix Achyranthis Bidentatae (RAB) and Eucommiae Cortex (EC),is widely used to treat osteoporosis.Herein,we determined whether this herbal pair can be used to ameliorate glucocorticoid (GC)-induced
【机 构】
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Central Laboratory of Science and Technology Department,Longhua Hospital,Shanghai University of Trad
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Objective:In traditional Chinese medicine,the herbal pair,Radix Achyranthis Bidentatae (RAB) and Eucommiae Cortex (EC),is widely used to treat osteoporosis.Herein,we determined whether this herbal pair can be used to ameliorate glucocorticoid (GC)-induced osteoporosis (GIOP) and find its optimal dosage in zebrafish.Methods:The characteristics of the aqueous extract of RAB and EC were separately characterized using high-performance liquid chromatography.Osteoporosis was induced in 5-day post-fertilization zebrafish larvae by exposing them to 10 μmol/L dexamethasone (Dex) for 96 h.Seven combinations of different ratios of RAB and EC were co-administered.Treatment efficacy was determined by calculating zebrafish vertebral area and sum brightness,via alizarin red staining,and by detecting alkaline phosphatase (ALP)activity.Multiple regression analysis was conducted to test the optimal dosage ratio.Results:According to the Chinese Pharmacopoeia (2015),β-ecdysone (β-Ecd) is a major bioactive marker in RAB extract,while pinoresinol diglucoside (PDG) is the major marker in EC extract.Both of β-Ecd and PDG content values aligned with the Chinese Pharmacopoeia standards.Treatment with 10 μmol/L Dex reduced zebrafish vertebral area,sum brightness,and ALP activity,but RAB and EC attenuated these effects.Combining 50 μg/mL RAB and 50 μg/mL EC was optimal for preventing GIOP in zebrafish.Reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction was used to evaluate the mRNA expression of osteogenesis-related genes.A treatment of 10 μmol/L Dex decreased runt-related transcription factor 2(Runx2),osteogenic protein-1 (OP-1),bone γ-carboxyglutamic acid-containing protein (BGLAP),andβ-catenin levels.This effect was counteracted by RAB and EC co-treatment (P ＜ 0.05).Additionally,the effect of using the two herbal extracts together was better than single-herb treatments separately.These results demonstrated that RAB and EC preserve osteoblast function in the presence of GC.The best mass ratio was 1∶1.Conclusion:RAB and EC herbal pair could ameliorate GC-induced effects in zebrafish,with 1∶1 as the opti-mal dosage ratio.
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