人参氧化角鲨烯环化酶的基因克隆

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为了从酶、基因水平阐明甾醇及三萜的生物合成机制,以人参毛状根进行了研究。曾报告由人参毛状根制备的微粒体组分中,检测到由氧化角鲨烯向环阿尔廷醇、达玛烯二醇及β-香树脂醇环化的3种酶活性。本次进行了环阿尔廷醇合酶的cDNA克隆。 由皂甙产量最多的培养第3周的人参毛状根提取mRNA,以逆转录得到的cDNA为模板,用在氧化角鲨烯环化酶间同源性非常高的序列(拟南芥第162、467、556及623开始的序列)设定的4种引物进行嵌套式 In order to elucidate the biosynthetic mechanism of sterols and triterpenoids from the enzyme and gene level, studies were conducted on the hair roots of ginseng. It has been reported that among the microsomal components prepared from the hairy root of ginseng, the activity of three enzymes that cyclize from oxidized squalene to cycloartinol, damarenediol, and β-mailresin was detected. A cDNA cloning of cyclin acetyl alcohol synthase was performed this time. The mRNA of the ginseng hairy roots cultured from the 3rd week of saponin production was used, and the reverse transcribed cDNA was used as a template for the sequence with very high homology between oxidosqualene cyclase (Arabidopsis thaliana 162, Sequences starting with 467, 556, and 623) nested 4 primers
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