【摘 要】
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研究目的：克隆表达人肠激酶轻链编码基因，以期应用于融合蛋白的切割与纯化．方法：从人的全基因组中扩增出编码人肠激酶轻链的5个外显子基因片段，经过酶切、连接后得到正确编码的人
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研究目的：克隆表达人肠激酶轻链编码基因，以期应用于融合蛋白的切割与纯化．方法：从人的全基因组中扩增出编码人肠激酶轻链的5个外显子基因片段，经过酶切、连接后得到正确编码的人肠激酶轻链完整基因序列；随后，将目的基因片段插入原核表达载体pBV220中，构建成融合型表达载体pBV—EKL，转化大肠杆菌BL21（DE3），调节温度至42℃诱导重组蛋白表达；通过镍亲和层析纯化得到重组蛋白．结果：所表达的重组蛋白经SDS—PAGE分析，相对表观分子质量约为31kDa，表达量占菌体总可溶蛋白量的46％；通过镍亲和层析纯化
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