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目的：探讨霍乱疫苗株NFYY101溶血素htya基因敲除及绿色荧光蛋白的构建。方法：将hlya基因上游片段（hlyAup）、hlyA下游片段（hlyAdown），克隆入pUC18中，再在两者间插入绿色荧光蛋白（laczGFPuv）基因，获得重组质粒pUC18一hlyAup-laczGFPuv-hlyAdown，再构建重组自杀质粒pCVD442-hlyA uplaczGFPuv-hlradown，接合入霍乱疫苗株NFYY101中，进行同源重组。结果：正确构建重组自杀质粒pCVD442-hlyaup—lacz