FGF13VY腺病毒过表达载体的构建及其鉴定

• 作 者: 董梅 陈宇峰 孙如梦 华乐 杨甫 孟丹琳 杨晶 王川
• 机 构: 河北科技大学校医院,河北医科大学基础医学院,河北医科大学生理学教研室,河北医科大学药理学教研室
• 出 处: 安徽医科大学学报
• 发表日期: 2018年12期
• 关键词: FGF13VY 腺病毒载体 绿色荧光蛋白 背根神经节 FGF13VY adenovirus vector GFP dorsal root ganglion
• 基金项目: 国家自然科学基金(编号:81770407),河北省自然科学基金(编号:H2017206262、C2018206277),河北省高等学校科学技术研究项目(编号:ZD2015007、ZD2016002、Z2015005),河北省高层次人才资助项目(编号:A2017005070),河北医科大学大学生创新性实验计划项目(编号:USIP201509A)

利用PCR技术扩增目的基因FGF13VY亚型,经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体pShuttle-CMV中,进而转化至含有AdEasy质粒的大肠杆菌中,进行重组。将所产生的腺病毒载体转染在HEK-293细胞中,进行腺病毒的包装、分泌和扩增,将所获得的腺病毒在背根神经节中进行过表达,可检测到腺病毒携带的绿色荧光蛋白表达在背根神经节神经元,qPCR检测到FGF13VY mRNA的表达明显升高。FGF13VY腺病毒过表达载体的成功构建,为研究其在DRG神经元中作用奠定了基础。