貉微卫星DNA富集文库的构建与鉴定

• 作 者: 闫守庆 李冰 祝万菊
• 机 构: 吉林大学
• 出 处: 东北林业大学学报
• 发表日期: 2008年6期
• 关键词: 貉 微卫星 遗传标记 Raccoon dogs Microsatellite Genetic markers
• 基金项目: 吉林大学青年教师基金资助.

貉基因组DNA经限制性内切酶MboI酶切，用2．0％琼脂糖凝胶电泳回收200—800bp的DNA片段，与MboI连接头连接，连接产物与生素物标记的（AC）n微卫星探针变性及退火，再通过链亲和素偶联磁珠亲和捕捉，经吸附、洗涤及洗脱，然后以洗脱产物为模板，通过PCR扩增，与pUCm-T载体连接，转化大肠杆菌DH5α，构建貉（AC）n微卫星DNA富集文库，经测序分析表明该文库含重组克隆约2800个，其中含有（AC）。微卫星DNA序列的阳性克隆占71．4％。