纳米磁性颗粒介导的辣椒遗传转化体系建立

• 作 者: 孙国胜 杨宇 许可翠 张昌伟 戴忠良 孙春青 马志虎
• 机 构: 江苏丘陵地区镇江农业科学研究所,南京农业大学园艺学院
• 出 处: 核农学报
• 发表日期: 2021年6期
• 关键词: 辣椒 磁性纳米颗粒 花粉 CRISPR/Cas9
• 基金项目: 镇江市重点研发计划—现代农业(NY2017003)。

为建立一套可操作性强、广谱性强、高效的基因编辑辣椒遗传转化体系,以辣椒B2为试验材料,磁性纳米颗粒(magnetic nanoparticles, MNPs)和载体质粒pCas9-TPC按质量比1∶1复合30 min后,加入混有辣椒花粉的培养基中,于MagnetoFACTOR plate24磁板下室温放置30 min,在磁场作用下导入花粉。将携带CRISPR/Cas9基因载体的花粉进行人工授粉,果实成熟后收获种子。通过载体质粒DNA上携带的抗除草剂(草铵膦)抗性标记,检测转化情况。提取T0代植株的DNA和