大肠埃希氏菌-胸膜肺炎放线杆菌穿梭载体构建

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合成胸膜肺炎放线杆菌质粒pKMA2425上长度为126bp及2214bp的2个DNA片段,克隆到大肠埃希氏菌质粒pGSI中,获得重组质粒pGSIA。PCR扩增pTKRED上的大观霉素抗性基因及线性化的pGSIA(126bpDNA片段-pGSI-2214bpDNA片段),连接,电转化胸膜肺炎放线杆菌。在大观霉素的选择压力下筛选鉴定到连接正确的质粒,命名为pGSIAS。pGSIAS测序结果符合预期。在大观霉素的选择压力下,含有pGSIAS的胸膜肺炎放线杆菌血清1~10型菌株均生长良好;在氨苄青霉素的选择压力下
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