【摘 要】
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目的 探讨破骨细胞凋亡释放凋亡小体介导成骨活性的作用.方法 通过小鼠(n=10)骨髓单核细胞体外诱导破骨细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和细胞骨架F-actin与DAPI双标免
【机 构】
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安徽省庐江县人民医院骨科,江南大学附属医院中西医结合研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金(81770876),江苏省自然科学基金(BK20191141)。
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目的 探讨破骨细胞凋亡释放凋亡小体介导成骨活性的作用.方法 通过小鼠(n=10)骨髓单核细胞体外诱导破骨细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和细胞骨架F-actin与DAPI双标免疫荧光鉴定破骨细胞,破骨细胞与小鼠成骨细胞MC-3T3E1共培养体系,DNA片段化ELISA分析破骨细胞凋亡,凋亡小体标志物检测,骨形成标志物Real-time PCR分析,凋亡小体微小RNA(miRNA)表达谱芯片筛查.结果 100 μmol/L阿伦膦酸钠(ALN)诱导成熟破骨细胞凋亡,并释放凋亡小体;Western blotting检测表明,ALN诱导凋亡小体特异性表面标志物蛋白表达增强;破骨细胞凋亡小体蛋白C3b表达增高与成骨细胞活性负相关;凋亡小体表达谱芯片筛查提示,miR-30a与骨形成标志物血清碱性磷酸酶(ALP)相关.结论 破骨细胞凋亡释放的凋亡小体携带miR-30a抑制成骨细胞活性,凋亡小体可能参与破骨细胞与成骨细胞的对话.
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