【摘 要】
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目的 建立能在野外或现场应用的黄热病毒反转录恒温热隔绝式PCR(reverse transcription-insulatedisothermalPCR,RT-iiPCR)快速检测方法。方法 针对黄热病毒基因组的5’UTR保
【机 构】
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珠海国际旅行卫生保健中心; 深圳市福田区疾病预防控制中心;
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目的 建立能在野外或现场应用的黄热病毒反转录恒温热隔绝式PCR(reverse transcription-insulatedisothermalPCR,RT-iiPCR)快速检测方法。方法 针对黄热病毒基因组的5’UTR保守区设计检测引物和TaqMan-MGB探针,优化引物、探针、Taq酶、反转录酶和PCR增强剂等各组分的浓度,利用POCKITTM分析平台,建立黄热病毒的RT-iiPCR检测方法,评价方法的稳定性、特异性、灵敏度和检测限等指标。结果 建立了稳定可靠的黄热病毒RT-iiPCR检测方法,在POCKITTM分析平台上只需一键操作即可在58min内完成检测并自动报告结果。性能评价试验显示该方法稳定性好,特异性和灵敏度分别达到100.00%和92.31%,检测下限≥1000拷贝。结论 率先建立了黄热病毒RT-iiPCR检测方法,该方法简便实用,适合于现场快速检测。
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