黑曲霉DL08内切葡聚糖酶基因的克隆表达及酶学性质研究

• 作 者: 王晓辉 张庆芳 迟乃玉
• 机 构: 大连大学生命科学与技术学院
• 出 处: 食品与发酵工业
• 发表日期: 2014年6期
• 关键词: 黑曲霉 内切葡聚糖酶 表达 纯化 酶学特性 Aspergillus niger DL08 endo-β3-1 4-glucanse expression
• 基金项目: 国家高技术研究发展计划（863计划）项目（No.2007AA021306）

通过反转录PCR（RT-PCR）从黑曲霉（Aspergillus niger）DL08中提取内切葡聚糖酶基因（GeneBank No.KJ437592）,PCR测序表明该基因全长999个核苷酸,编码332个氨基酸,预测相对分子质量为36.75 kDa,等电点（pI）为4.38,命名eg1。结构域分析表明,该蛋白包括18个氨基酸构成的信号肽和C末端1个糖基水解酶家族5的催化结构域。重组内切葡聚糖酶蛋白通过Ni-NTA亲和层析柱纯化,酶学性质研究表明,以羧甲基纤维素钠为底物时重组酶最适作用pH为5.0,最适作