抑制核因子-kB活性对肝肺综合征大鼠肺血管内巨噬细胞iNOS表达的影响

• 作 者: 高君 王宇 张忠涛 李建设 马雪梅
• 机 构: 首都医科大学附属北京朝阳医院京西院区肝胆胰脾外科,100043,首都医科大学附属北京友谊医院普外科,100059,首都医科大学附属北京友谊医院普外科,100059,首都医科大学附属北京友谊医院普外科,
• 出 处: 中华肝胆外科杂志
• 发表日期: 2009年15期

目的 研究抑制核因子-kB（NFKB）活性对肝肺综合征（HPS）大鼠肺血管内巨噬细胞（PIM）内诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。方法Sprague—Dawley（SD）大鼠随机分为4组：对照组，吡咯醛二硫氨基甲酸（PDTC）对照组，CCl4组，CCl4＋PDTC组。对照组不做任何处理。CCl4组，肌注CCl4（3ml／kg·4d），共16次。CCl4＋PDTC组，注射CCl4第4次后，腹腔注射PDTC（20mg／kg·48h）。PDTC对照组，仅按CCl4＋PDTC组方法注射PDTC。取动脉血作血气分析，静脉血测内毒素和肝功能。取肠系膜淋巴结作细菌培养。应用免疫组化方法观察PIM的黏附、聚集情况，以及iNOS和NF—kB的蛋白表达和定位。以非放射性凝胶电泳阻滞实验（EMSA）检测NF—kB活性，sYBRGreen Ⅰ实时定量PCR方法检测肺组织中iNOS的mRNA表达。结果CCl4组发展成HPS模型，表现为PaO2、PaCO2降低和肺泡～动脉血氧分压差（A—aDO2）升高，肝功能异常，内毒素血症，所有数值都与对照组和PDTC对照组有显著性差异（P〈0．05）。CCl4组肠系膜淋巴结培养阳性率为62．5％（5／8），与CCl4＋PDTC组的66．7％（6／9）无统计学差异（P=1．000）。CCl4组中超过10个巨噬细胞的血管为60．8％（292／480），CCl4＋PDTC组中超过10个巨噬细胞的血管仅为19．6％（106／540），两组间存在非常显著性差异（P〈10．01）。对照组和PDTC对照组中肺血管内无巨噬细胞聚集。肺组织切片免疫组化染色检测NF-kB和iNOS蛋白均在CCI。组的PIM中表达。CCl4组的NF—kB活性明显高于对照组和PDTC对照组（P〈0．05）。CCl4＋PDTC组的NFKB活性明显低于CCl4组（P〈0.05），而与对照组和PDTC对照组之间无显著性差异（P〉0．05）。CCl4组的iNOS的mRNA表达明显高于对照组和PDTC对照组（P〈0．05）。CCl4＋PDTC组的iNOS的mRNA表达明显低于CCl4组（P〈0．05），而与对照组和PDTC对照组之间无显著性差异（P〉0．05）。结论NF—kB诱导PIM内iN0s高表达在HPS中发挥重要作用，PDTC可能通过抑制PIM中NFKB的活性，降低PIM活性以及其中iNOS表达，从而改善HPS。