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目的
构建肺炎链球菌家族Ⅰ中支系1和2肺炎链球菌表面蛋白A(PspA)重组融合蛋白,分析融合蛋白的免疫原性。
方法PCR扩增目的基因片段,构建重组质粒并表达,ELISA检测抗体滴度和亲和度,以及抗蛋白血清特异性和免疫交叉性。
结果成功构建重组质粒并原核表达。血清中抗体滴度可达到1×104,亲和度达到2×105,调理吞噬试验阳性,保护试验效果显著。
结论肺炎链球菌家族Ⅰ中支系1和2肺炎链球菌表面蛋白A(PspA)重组融合蛋白具有较高的免疫原性,能够诱导小鼠产生高滴度和高特异性的抗体,具有免疫交叉保护性。