橄榄ISSR-PCR反应体系的优化

• 作 者: 刘天亮 潘东明 许长同 李开拓 王江波 施维属
• 机 构: 福建农林大学园艺学院,福建农林大学园艺产品贮藏保鲜研究所,福州市农业局
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2010年7期
• 关键词: 橄榄 ISSR 优化 PCR Olive ISSR Optimize PCR

采用正交设计和单因素试验，以BDB（CA），为引物，对ISSR—PCR扩增橄榄基因组DNA的主要影响因子进行了筛选和分析，优化了适宜于橄榄ISSR—PCR的扩增体系。结果表明，20μL的反应体系中采用40ng的模板DNA，0．2mmol／LdNTPs，0．25μmoL／LISSR引物、1UTaq聚合酶，以及51．6℃-53℃的复性温度为橄榄ISSR-PCR扩增的最优条件。