鹅细小病毒VP3基因的克隆及表达

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根据GenBank中的鹅细小病毒(GPV)全基因序列,设计并合成了1对特异性引物,利用PCR对GPV—Foshan-2009株的VP3基因进行了扩增。经酶切、连接、转化后,获得了pET32a-VP3重组表达载体。经BL21(DE3)原核表达显示,VP3蛋白为包涵体形式,37℃下该蛋白最佳IPTG诱导浓度为1.2nM,最佳诱导时间为5h。SDS—PAGE分析显示所表达的VP3融合蛋白的相对分子质量约80kD。WesternBlot证实该蛋白能与番鸭抗GPV阳性血清反应,这为GPV血清学诊断方法的建立提供了物
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