【摘 要】
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目的制备携带GFP基因的逆转录病毒，以简便、快速标记活细胞。方法将编码GFP的cDNA片段插入逆转录病毒载体pLNCX构建重组逆转录病毒载体pLNCX-GFP，借助脂质体转染单嗜性及双嗜性
【机 构】
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上海市第一人民医院中心实验室,DukeUniversityMedicalCenter
【基金项目】
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上海市卫生局资助项目，上海市科委资助项目，"白玉兰"基金
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目的制备携带GFP基因的逆转录病毒，以简便、快速标记活细胞。方法将编码GFP的cDNA片段插入逆转录病毒载体pLNCX构建重组逆转录病毒载体pLNCX-GFP，借助脂质体转染单嗜性及双嗜性逆转录病毒包装细胞，G418筛选抗性克隆，然后利用荧光显微镜选出GFP表达最高的克隆。取含病毒颗粒的上清液感染NIH3T3及多种肿瘤或血管内皮细胞。结果重组逆转录病毒载体pLNCX-GFP转染包装细胞后，包装细胞可表达GFP并产生GFP逆转录病毒。尽管GFP逆转录病毒对动物及人的肿瘤细胞或血管内皮细胞的感染能力各不相同，
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