【摘 要】
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目的观察普罗布考对人视网膜色素上皮(Human retinal pigment epithelial,hRPE)细胞抗过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)损伤的影响。方法以传代培养hRPE细胞为研究对象,预处理组
【机 构】
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华北理工大学基础医学院病理学系; 开滦总医院林西医院; 天津市眼科医院; 开滦总医院眼科;
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目的观察普罗布考对人视网膜色素上皮(Human retinal pigment epithelial,hRPE)细胞抗过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)损伤的影响。方法以传代培养hRPE细胞为研究对象,预处理组根据普罗布考浓度不同分成4个亚组(20μmol/L组、40μmol/L组、60μmol/L组、80μmol/L组),各亚组普罗布考作用24h之后加入500μmol/L H2O2作用24h建立氧化损伤模型;单纯损伤组:损伤及培养条件同预处理组,但不加普罗布考;正常对照组:相同条件培养,不加普罗布考且不用H2O2损伤。应用比色法测定乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)细胞释放率和细胞脂质过氧化产物丙二醛(Maleic dialdehyde,MDA)含量;免疫细胞化学方法检测细胞内核因子Kappa B(Nuclear factor kappa B NF-κB)的表达情况。结果 DH释放率、MDA含量及NF-κB核移位率,单纯损伤组较正常对照组明显升高,各预处理组与单纯损伤组相比均明显降低,预处理组之间随着普罗布考的浓度增加,LDH释放率、MDA含量以及NF-κB核移位率均逐渐降低(P<0.05)。线性相关分析结果显示,普罗布考浓度与LDH细胞释放率、MDA含量、NF-κB核移位率均呈负相关。正常对照组细胞中NF-κB免疫细胞化学染色呈阴性表达。单纯损伤组内几乎所有细胞NF-κB均呈核阳性染色。预处理组随着普罗布考浓度增大,NF-κB细胞核阳性染色数逐渐减少,染色程度亦逐渐减低。结论普罗布考预处理对hRPE细胞的氧化损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抑制NF-κB的活化有关。
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