靶向Livin基因siRNA载体的构建和沉默效应观察

• 作 者: 何群力 赵国新 苗立群 孙翔 王永玲 张明智
• 机 构: 新乡医学院微生物学教研室,河南省医学科学研究所,宝鸡市第二人民医院检验科,新乡医学院病理生理学教研室,郑州大学第一附属医院肿瘤科,新乡
• 出 处: 郑州大学学报：医学版
• 发表日期: 2007年4期
• 关键词: RNA干扰 LIVIN 载体 RNA interference Livin vector
• 基金项目: 教育部“十五”211工程重点学科建设项目

目的:构建针对人Livin基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体,并观察该载体对食管癌细胞Livin基因表达的沉默效应。方法:依据siRNA设计原则,分析Livin mRNA序列,设计并合成2个Livin靶向的发夹状siRNA靶序列,退火后分别连接入pSUPER-neo载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体包裹法将重组质粒转染人食管癌细胞EC9706,采用RT-PCR检测转染细胞Livin mRNA的表达。结果:经过酶切鉴定与测序,构建的靶向Livinα和Livinβ基因的siRNA载体,结果正确;RT